试管婴儿技术每年为全世界数十万的不孕不育夫妇带来福音 。常规试管婴儿技术分为几个步骤 :获取卵子 、采集精子 、体外受精 、胚胎培养 、胚胎移植 。体外受精失败或受精率低 ,不仅会降低卵子的利用率 ,减少可移植胚胎的数量,严重时甚至无可移植胚胎而被迫取消 ,增加患者的心理及经济负担 。
一 、常规体外受精的现状
体外受精是精子和卵子在体外完成受精过程的技术 ,根据精卵孵育时间主要分为长时授精和短时授精 。
长时授精是精子与卵子在受精液中共同孵育16-18h(即过夜受精)后 ,拆除卵子外周颗粒细胞观察原核,判断受精情况 。此时如果发现卵子不受精或受精率低(<30%) ,对其进行补救性卵胞浆内单精子注射(ICSI) ,称为晚补救 。但这种补救往往因为卵子在体外时间过久发生老化 ,从而影响补救的受精率和胚胎发育潜能 ,导致临床结局不佳 。
短时授精是指IVF授精4-6小时后 ,去除卵子周围的颗粒细胞 ,观察第二极体排出 ,预测受精情况 。第二极体的排出是判断卵子受精最早的标志 。但是每个卵子第二极体排出时间并不完全一致 ,也有些卵子的第一极体有破碎或异常 ,这就导致判断存在一定的困难 ,依赖胚胎师的经验 。此时通过判断 ,卵子不受精或受精率低 ,就对其进行补救性ICSI ,称为早补救 。目前 ,国内大多数生殖中心都采用短时授精结合早补救ICSI的方法 ,以期减少受精失败 ,增加患者妊娠机会 。
双原核受精卵
二 、补救ICSI的时间选择
补救ICSI时间的选择至关重要 ,不仅要在该时间段内观察到是否有第二极体释放 ,又需要卵子尽量处于最佳受精时间窗 。有学者研究表明授精后4-8h观察到受精失败 ,并对受精失败卵子实施早期补救ICSI技术,其受精率高于8.1-12h和18-20h后的补救 。
卵胞浆内单精子注射(ICSI)
三 、IVF受精失败因素浅析
IVF受精失败并不能简单的认为卵子异常 ,原因比较复杂 。
首先是精子进入卵子的过程出现问题 ,卵子透明带异常 ,精子穿透困难是受精失败最常见的原因 。另外基因缺陷 ,精卵识别障碍 ,也会导致受精失败 。各种原因导致的精子不能进入卵子内 ,运用ICSI技术基本上能解决受精问题 。
其次卵子成熟度不足也是受精率低下或者完全受精失败的重要原因之一 ,卵子的成熟需要细胞核和细胞质的同步成熟 。取卵后如果发现大部分卵细胞核不成熟 ,通常胚胎师会建议追加行卵子体外成熟(IVM)培养数小时 ,等待卵子成熟后再行ICSI授精 。卵子胞质成熟不全通常在形态上无法判断 ,但细胞胞浆因蛋白合成不全或信息传导异常 ,可能影响到皮质颗粒释放 ,不能有效的阻止多余精子进入卵子 ,可能形成多精受精 ;反之 ,如果皮质反应过早出现 ,也可以导致IVF不受精 。通常建议下周期调整促排卵方案 。
总结
据报道 ,多数生殖中心的常规IVF受精率为60%~70% ,而受精完全失败周期的发生率约占5% 。短时授精及补救ICSI的应用 ,有效减少了体外受精失败或低受精率的发生 ,降低了因无可移植胚胎而导致的周期取消率 ,改善了这部分人群的临床妊娠结局 。
判断短时授精是否需要补救与胚胎师的经验息息相关 ,如何在最佳时间内行补救ICSI ,同时又避免因判断失误导致多精受精 ,这种权衡是最考验胚胎师的技能之一 。每天在明月当空时 ,胚胎师轮班等在胚胎室 ,在为您的精卵结合尽最大努力 。